黄病毒
文 / 张凤民
黄病毒科（Flaviviridae）包括3个病毒属，即黄病毒属（flavivirus）、瘟病毒属（pestivirus）和丙型肝炎病毒属（hepacivirus），共有60多种病毒。由于黄病毒在病毒体形态结构、传播媒介以及所致疾病等方面与披膜病毒科中的甲组病毒相类似，曾经被归入披膜病毒科（Togaviridae）的黄病毒属。根据黄病毒的基因组结构、复制方式及形态发生学等方面的特点，1984年被独立命名为黄病毒科黄病毒属。主要包括登革病毒、流行性乙型脑炎病毒和森林脑炎病毒等。
由于黄病毒属的大多数病毒可以通过吸血昆虫媒介引起人类的多种疾病，故此类病毒也称为虫媒病毒（arbovirus）或节肢动物媒介病毒（arthropod borne virus）。除黄病毒科外，虫媒病毒还包括披膜病毒科、布尼雅病毒科等14个科的病毒。
这类病毒结构相似，大多数是20面体立体对称的有包膜的RNA病毒。它们能在节肢动物（如蚊、蜱、白蛉等）体内增殖，对节肢动物不致病，但可以通过昆虫叮咬传染给脊椎动物或人，引起自然疫源性疾病。大多数的病毒引起人畜共患的、自然疫源性疾病，呈多种多样的临床表现，主要包括脑炎或脑脊髓炎以及全身性感染等。由于节肢动物既是储存宿主又是传播媒介，其分布受地理与气候的影响，故虫媒病毒所致疾病具有明显的季节性和地域性。
第一节 登革病毒
登革病毒（dengue virus）属于黄病毒科黄病毒属中的一个血清型亚群，共有4个血清型。登革病毒主要通过埃及伊蚊和白纹伊蚊等媒介昆虫传播，引起登革热（dengue fever）以及发病率和死亡率很高的登革出血热（dengue hemorrhagic fever，DHF）和登革休克综合征（dengue shock syndrome，DSS）。
这些疾病广泛流行于热带和亚热带地区，是一种分布广、发病多、危害较大的人类传染病。在亚洲，太平洋群岛及中、南美洲等许多国家均已造成严重的威胁。近年，在亚洲、非洲和南美洲的热带以及亚热带地区登革病毒感染的发病率呈明显上升趋势。在我国海南、广东、广西和台湾等地均有流行的报道。
一、生物学性状
形态与结构 病毒颗粒呈球形，直径约55nm。病毒颗粒外被脂蛋白包膜，并具有包膜刺突。病毒包膜的外层含有包膜蛋白E，内层含有膜蛋白M。病毒核心是由病毒的单股、正链RNA（+ssRNA）和病毒衣壳蛋白C共同组成的20面体核衣壳结构。（图33-1）。病毒RNA具感染性。
图33-1 登革病毒的结构
基因与蛋白 登革病毒基因组RNA约含有11000个核苷酸，MW为4.2×106。其5′端为I型帽子结构，3′端缺乏poly(A)尾，基因组的5′端和3′端均有一段非编码区。基因组只有一个开放读码框，其5′端1/4编码病毒3个结构蛋白（C、PrM和E），3′端3/4编码7个非结构蛋白（NS1、NS2a、NS2b、NS3、NS4a、NS4b和NS5）。这些蛋白是以多聚蛋白形式进行翻译合成后，由宿主蛋白酶切割而形成的。C蛋白构成核衣壳，富含精氨酸、赖氨酸。PrM蛋白在病毒成熟时，经酶裂解形成膜蛋白M后，固定于病毒包膜内层。E蛋白是病毒包膜的主要糖蛋白，与病毒的细胞嗜性、红细胞凝集以及诱导红细胞凝集抑制抗体和中和抗体的产生等有关。非结构蛋白NS1功能不清。NS2a和NS2b可能参与多聚蛋白的水解过程。NS3可能是在细胞液中起作用的病毒蛋白酶。NS4a和NS4b可能与RNA复制有关。NS5是病毒编码的依赖RNA的RNA聚合酶。
复制周期 登革病毒与敏感细胞表面受体（可能是Fc受体）结合，通过细胞吞饮和膜融合形式进入细胞后，在溶酶体酶等作用下脱壳、释放病毒RNA。一方面，直接以病毒基因组RNA为mRNA，从单一翻译起始点开始合成多聚蛋白前体，进而经细胞信号酶的催化进行蛋白C与PrM、PrM与E、E与NS1之间的切割。因C、PrM和E蛋白都有N-糖基化结构，主要是在细胞的粗面内质网中完成切割，并且蛋白的翻译合成与切割是同步进行的。非结构蛋白的切割由水解酶作用完成。另一方面，在NS5聚合酶的作用下，首先以病毒基因组RNA为模板合成负链RNA，再由负链RNA复制合成子代病毒基因组+ssRNA。最后，病毒的+ssRNA和衣壳蛋白C在细胞浆中装配成病毒核衣壳后，通过出芽释放的形式获得含有膜蛋白M和包膜蛋白E的病毒包膜，形成完整的病毒颗粒。
培养特性 登革病毒可以在多种昆虫和哺乳动物细胞培养中增殖，并引起培养细胞发生折光性增强、细胞变圆或细胞融合等不同程度的细胞病变。昆虫传代细胞系，如白纹伊蚊C6/36等对登革病毒敏感，可用于病毒分离。哺乳动物细胞系，如人细胞系、乳地鼠肾细胞（BHK21）、胎猕猴肺细胞（FRhL）、原代狗肾细胞（PDK）等可用于病毒效价的滴定和疫苗的制备。
抗原性 根据病毒包膜蛋白E的抗原性不同，登革病毒分为1～4个血清型。各型病毒之间抗原性有交叉，但与黄病毒科的其它抗原群无交叉性。病毒包膜蛋白E的抗原决定簇既可以诱导宿主产生保护性的中和抗体和血凝抑制抗体，还可能参与登革出血热（DHF）和登革休克综合征（DSS）的发生。非结构蛋白NS1和NS3均具有免疫反应性和免疫原性，可以诱导小鼠产生针对同型登革病毒致死性攻击的保护性免疫。NS1是一种可溶性补体结合抗体，具有登革病毒的型和群特异性抗原决定簇。
变异性 登革病毒易发生变异。病毒核苷酸序列分析结果表明相同血清型病毒中不同分离株间的核苷酸变异为10%，而不同血清型病毒间的核苷酸变异为30%。并且根据病毒寡核苷酸指纹图谱的同源程度，可以将同型病毒的不同毒株分为不同的拓扑型。由病毒变异后所形成的新的登革病毒毒株常常可引起地区性登革热的爆发流行。
抵抗力 病毒对热敏感，56℃30分钟可以灭活。氯仿、丙酮等脂溶剂、脂酶或去氧胆酸钠可以通过破坏病毒包膜而灭活登革病毒。病毒经去垢剂处理后释放出的病毒核酸可以被核酸酶迅速降解。病毒对胃酸、胆汁和蛋白酶均敏感。对紫外线、γ射线敏感。酒精、1%碘酒、2%戊二醛、2%～3%过氧化氢、3%～8%甲醛等消毒剂可以灭活登革病毒。
二、致病性与免疫性
传染源与传播媒介 登革病毒感染的自然宿主包括人、低等灵长类和蚊子。登革病毒的媒介昆虫是伊蚊属成员，在登革热疫区的主要传播媒介是埃及伊蚊和白纹伊蚊。这些伊蚊在全世界大多数地区散布存在，当叮咬感染了登革病毒的人或动物时，可以通过改换叮咬对象而直接传播病毒。登革病毒可以在蚊子唾液腺细胞中繁殖8天～10天后随着再次吸血而传播。感染病毒的蚊子可以终生保持传播登革病毒的能力，并可经卵遗传给后代。伊蚊的卵对干燥有很强的抵抗力，可以在体外长期存活。当人被携带登革病毒的蚊子叮咬时，可以通过形成蚊―人―蚊循环进行传播和引起疾病。并且，由于登革病毒RNA的突变或新的外来毒株的侵入，常常可以引起登革热的爆发流行。
临床表现 登革病毒多引起无症状的隐性感染。发病患者的主要临床表现有登革热、登革出血热以及登革热―休克综合征。登革热以全身毛细血管内皮细胞的广泛性肿胀、渗透性增强、皮肤轻微出血的病理变化为主，与病毒感染的直接作用和免疫病理损伤作用密切相关；主要表现为发热，肌肉痛和骨、关节酸痛，伴有皮疹或轻微的皮肤出血点，血小板轻度减少。登革出血热、登革热-休克综合症多发生于再次感染异型登革病毒的患者或母亲抗登革病毒抗体阳性的婴儿，病死率高。登革出血热的病情较重，伴有明显的皮肤和粘膜的出血症状，血小板减少和血液浓缩显著；登革热-休克综合征除上述症状外，主要表现为循环衰竭、血压降低和休克等。
致病机制 病毒感染机体后，首先在毛细血管内皮细胞增殖，并释放入血形成病毒血症，然后进一步感染血液和组织中的单核-巨噬细胞而引起登革热。
登革出血热、登革热-休克综合症的可能发病机制是：①抗体依赖增强（antibody dependent enhancement，ADE）作用：虽然某型登革病毒感染后产生的抗体能与所有型别的病毒起交叉反应，但不能起中和作用。这些异型抗体或亚中和浓度的抗体，能与病毒颗粒相结合形成病毒抗体复合物，并通过IgG的Fc受体（FcR）结合和进入细胞繁殖，引起单核-巨噬细胞感染。这些感染的细胞可以携带病毒播散，引起全身性的感染。同时，机体的免疫作用、病毒抗体复合物等内源性刺激物作用被感染的单核-巨噬细胞时，可以激活细胞释放大量的活性因子，引起弥漫性血管内凝血（DIC）、出血、休克等一系列病理过程。②细胞免疫作用：CD4+细胞在病毒感染中辅助B细胞产生抗体，可能与宿主细胞的交叉免疫反应有关；并且在增殖反应中辅助T细胞产生IFN-γ，促进单核细胞FcR的表达，增强病毒感染。CD8+细胞毒性T淋巴细胞（CTL）具有血清型交叉反应性，能溶解被所有4型病毒抗原刺激或感染的细胞；可能参与病毒再次感染期间的免疫病理损伤。病毒感染可以激活各类T细胞并释放细胞因子IL-2、IFN-γ、组胺、过敏素C3a和C5a等，从而加重感染、休克、循环衰竭和出血等表现。
免疫性 登革病毒感染形成的机体免疫主要以体液免疫为主。登革病毒感染后产生的同型病毒特异性抗体可以保持终身，但同时获得的对其他血清型的免疫能力（异型免疫）仅持续6个月～9个月。如再次感染其它3型病毒，有可能引起DHF/DSS。病毒再次感染后激活的T淋巴细胞，可以对同型或其它型病毒发生反应，所释放的细胞因子可能参与DHF/DSS的发生。
三、微生物学检查法
大多数登革热病例可以根据发热、出血、肝大、休克或血小板减少等症状进行临床诊断。病毒分离、血清学诊断及病毒核酸检查是确切的诊断方法。
病毒分离 可用蚊细胞培养上进行病毒分离。一般采集患者发病初期血清接种白纹伊蚊C6/36株细胞分离病毒，亦可经胸内接种巨蚊的成蚊、或脑内接种巨蚊的幼虫进行分离。病毒分离后，可以使用登革病毒血清特异性单克隆抗体，在2周内通过间接凝集实验进行病毒的鉴定。
血清学诊断 一般采用血凝抑制试验进行血清学检查。在初次感染中，血凝抑制抗体滴度于感染症状出现后4天内一般低于1:20，但在症状出现后1周至数周内恢复期血清中呈4倍以上的增高，可高达到1:1280。在登革病毒的再次感染中，交叉反应抗体的快速出现为主要特征；血凝抑制抗体滴度在急性期为1:20，在恢复期可升至≥1:2560。如急性期血凝抗体滴度≥1:1280，可判定为近期感染。另外，用ELISA法检测患者血清中登革病毒特异性的IgM抗体，有助于登革病毒感染的早期诊断。
病毒核酸检测 用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法，可以检测病毒的双重或多重感染。即在一对通用引物的作用下同时扩增4个型别的病毒后，经内引物扩增、核酸杂交或酶切分析的方法来进一步鉴定病毒的型别；或者用型特异的引物，直接检测标本中的单一型别病毒。另外，用原位杂交技术可以自DHF患者的白细胞涂片或DSS死者胸腺切片中检出不同血清型登革病毒的RNA。
四、预防原则
控制传播媒介 控制传播媒介、防止蚊虫叮咬是防治登革病毒感染的重要措施。曾使用杀虫剂消毒成蚊孳生地进行蚊虫控制。但由于杀虫剂的抗性等原因，目前主要通过清除蚊虫孳生场所、开展宣传教育增强居民自行清理蚊虫孳生场所的意识，改善环境卫生条件等方式控制蚊虫的数量。
预防接种 目前尚无安全、有效的登革病毒疫苗。用DEN1～4型混合的减毒活疫苗具有一定的免疫效果；但减毒株的稳定性差，有可能引起临床症状和发生因ADE作用而导致的DHF和DSS。一般认为，非结构蛋白NS1不能诱导ADE作用，所以用DNA重组技术制备非结构蛋白NS1亚单位疫苗或基因工程疫苗等可能获得满意的免疫效果。
第二节 流行性乙型脑炎病毒
流行性乙型脑炎病毒（epidemic type B encephalitis virus）属黄病毒科、黄病毒属。1935年由日本学者首先从脑炎患者的脑组织中分离获得，曾命名为日本乙型脑炎病毒（Japanese B encephalitis virus），以与甲型（昏睡型）脑炎相区别；在我国称为流行性乙型脑炎病毒。
该病毒通过蚊子等昆虫传播，库蚊是其主要的传播媒介。该病毒感染有明显的季节性，感染人类主要引起流行性乙型脑炎，临床表现多样，致死率达10%～40%。目前在我国除西藏、青海、新疆3省（区）外，所有地区（包括台湾省）均有流行性乙型脑炎的发生。
一、生物学性状
形态与结构 病毒颗粒呈球形，直径40nm，外被脂蛋白包膜。病毒包膜的表面有包膜糖蛋白E组成的刺突，包膜内层为膜蛋白M；病毒核心为20面体对称的病毒核衣壳，直径20nm～30nm，由单股、正链RNA（+ssRNA）和病毒核蛋白C组成。病毒RNA具有感染性。
基因与蛋白 流行性乙型脑炎病毒的基因组、蛋白质组成及其复制特点与登革病毒相似。病毒基因组RNA约含11kp，仅含有一个开放读码框（ORF），主要编码三种结构蛋白和七种非结构蛋白。病毒结构蛋白有膜蛋白M、核蛋白C和包膜蛋白E。其中，膜蛋白M位于病毒包膜的内层，核蛋白C组成病毒的核衣壳，包膜蛋白E是锚定在病毒包膜上的糖蛋白，具有血凝活性，能凝集雏鸡、鸽和鹅的红细胞，其相应的特异性抗体可以抑制血凝、并具有中和病毒的作用。
培养特性 病毒在多种动物的组织细胞和鸡胚内均能增殖。敏感动物是小鼠或乳鼠，鼠龄越小，易感性越高。脑内接种流行性乙性脑炎病毒后，经3～5天潜伏期，乳鼠出现耸毛、蜷伏、神经系统兴奋性增高、肢体痉挛等症状，不久转入麻痹期而死亡。受感染的鼠脑组织含有大量病毒。病毒可以在C6/36、BHK21、Vero等细胞系或地鼠及猪肾的原代细胞中增殖并引起明显的CPE；并且病毒可以在软营养琼脂覆盖的培养细胞单层上形成蚀斑。病毒在鸡胚卵黄囊中接种，常于48小时后达到增殖高峰。
抗原性与变异 该病毒抗原性稳定，较少发生变异，不同地区和不同时间分离的病毒株之间无明显的抗原性差异。迄今只发现1个血清型，抗原性单一，因此疫苗预防效果较好。包膜蛋白E是病毒的主要抗原，可以刺激机体产生中和抗体；膜蛋白M和核蛋白C也具有一定的抗原性。非结构蛋白NS5也可以刺激机体产生中和性抗体。
抵抗力 流行性乙型脑炎病毒抵抗力弱。对热敏感，56℃ 30分钟或100℃ 2分钟可灭活；但在低温中能较长时间保存，-20℃可以存活数月，在-70℃可以保存数年。对乙醚、丙酮等脂溶剂也较敏感。病毒可以在短时间内被消毒剂（如3%～5%的苯酚液等）灭活。
二、致病性与免疫性
传染源与传播媒介 流行性乙型脑炎病毒在自然界中主要存在于蚊子及家畜体内。蚊子是该病毒的传播媒介，在我国主要是三节吻库蚊。在广东、福建等地，蠛蠓也可能是传播媒介。蚊子可携带病毒越冬，病毒可以经卵遗传至子代蚊子。因此，蚊子又是流行性乙型脑炎病毒的长期储存宿主。家畜是流行性乙型脑炎病毒的扩增宿主，也是三节吻库蚊的吸血对象。当病毒在蚊子肠道和唾液腺内增殖至一定数量后，可以随着蚊子（带毒期14天）叮咬猪（幼猪多见）、牛、羊、马等家畜时感染这些家畜。家畜被病毒感染后一般仅出现短暂的（4天左右）的病毒血症，而多无明显的临床症状。但有时可发生马脑炎、猪睾丸肿大、母猪流产或死产等表现。
一般情况下，病毒可以在猪和三节吻库蚊之间形成自然感染循环，在猪体内增殖的病毒可以随着三节吻库蚊的叮咬和改变叮咬对象而传染给人。（图33-2）。
图33-2 流行性乙型脑炎病毒感染的自然循环
流行情况 由于在流行性乙型脑炎的流行区内，猪发生病毒血症的时间比人群发病高峰早1～2个月。因此，在流行季节前，通过检查猪的病毒血症和带毒率，可预测当年人群的流行程度。并且，通过对猪采取特异性预防措施，有可能控制流行性乙型脑炎在猪及人群中的流行。
流行性乙型脑炎在我国南方的流行高峰是6～7月，华北为7～8月，东北为8～9月，均与各地区的蚊虫密度高峰相一致。流行性乙型脑炎呈高度散发性，一个家庭中多人同时发病者的情况少见。
致病性 流行性乙型脑炎病毒感染人体的典型病例是引起流行性乙型脑炎。但是，绝大多数病例表现为隐性感染或仅出现轻微症状。只有少数病例发生脑炎，出现中枢神经系统症状。病毒随蚊子叮咬侵入人体后，首先在皮下毛细血管内皮细胞和局部淋巴结等处增殖，并释放入血、形成第1次病毒血症；进而，病毒随血流播散到肝脏、脾脏等处的单核―巨噬细胞中继续增殖，经10天左右的潜伏期，在体内增殖的大量病毒，再次侵入血流造成第2次病毒血症，引起发热、寒战及全身不适等症状。此时病毒可以形成顿挫感染，经数日后自愈。但有少数（约0.1%）患者体内的病毒可以突破血脑屏障、进入脑组织细胞中进行增殖，造成脑实质及脑膜病变。临床表现为突然高烧、头痛、呕吐或惊厥、昏迷等脑膜刺激症状及脑炎症状。死亡率一般为10%～30%。部分患者痊愈恢复后可残留精神障碍、运动障碍等严重的后遗症。
免疫性 流行性乙型脑炎发病后或病毒隐性感染均可刺激机体产生持久的免疫力。除了体液免疫的作用之外，完整的血脑屏障和细胞免疫也具有重要的抗病毒感染作用。机体感染流行性乙型脑炎病毒后，首先出现IgM型血凝抑制（HI）抗体，抗体滴度在感染后2周达高峰，可持续5～6个月；其次是IgG型中和（NT）抗体，抗体滴度在病后1周内出现，可持续5年以上，甚至终生；补体结合（CF）抗体一般于病后2周出现，4个月内消失，无保护作用。近年，由于儿童和青少年广泛接种流行性乙型脑炎疫苗而获得满意的免疫力。所以儿童和青少年流行性乙型脑炎患者相对减少，而成人和老年人的发病率相对增高。
三、微生物学检查法
一般情况下，根据临床表现和流行病学资料可以进行临床诊断。确诊需要进行血清学诊断、病毒抗原或核酸的检测以及病毒分离等。
血清学诊断 由于血凝抑制（HI）抗体、中和（NT）抗体和补体结合（CF）抗体的出现和消失时间不同，各种抗体的检测结果意义不同。（图33-3）。
图33-3 流行性乙型脑炎的临床症状与病毒相应抗体的关系
（1）ELISA试验：用于检测特异性IgM和IgG。敏感性和特异性较高，可用于临床早期诊断和大规模的流行病学调查。
（2）血凝抑制（HI）试验：HI抗体、特别是IgM型HI抗体可以于发病后5天出现，2周～3周达高峰。因此HI试验可用于早期诊断。同时，结合2-巯基乙醇（2ME）耐性试验，可以对比检测特异性IgM抗体的滴度。即将待检血清用2ME处理，破坏血清中IgM抗体，如经2ME处理的血清效价比未处理的血清效价下降4倍或更多，可视为病毒特异性IgM抗体为阳性。大多数患者病后4天～8天可查出特异性IgM，急性期患者约75%为阳性。
（3）补体结合（CF）试验：CF抗体常于病后第2周出现，第3～5周达高峰。当CF试验在恢复期血清中抗体滴度比早期升高4倍以上时，即可以进行辅助诊断。CF抗体一般只持续2个月～4个月，因此可以辅助诊断病毒的新近感染。
（4）中和（NT）试验：本试验具有较高的特异性和敏感性，常用于流行病学调查。由于NT抗体产生后在体内持续时间较长，故不宜做临床诊断用。
病毒抗原或核酸检测 用免疫荧光、ELISA和反向间接血凝实验等可以对发病初期的患者血清、血液或脑脊液中的病毒抗原进行特异性检测，获得阳性结果具有诊断意义。用RT-PCR法检测流行性乙型脑炎病毒的特异性RNA片段，敏感性和特异性较高，适合于对尚未产生抗体的患者进行早期诊断。
病毒分离 由于病毒感染人体后形成病毒血症的持续时间短暂，病毒滴度低，故从血液或CSF分离病毒极为困难。从尸体分离病毒较为容易，即取死者脑组织制成悬液进行小鼠脑内接种分离病毒。经鼻孔穿通颅底骨取下丘脑黑质部进行病毒分离，用荧光抗体法检查病毒特异抗原。对于分离到的病毒，可以用已知的特异性抗血清进行血清学鉴定。
四、防治原则
防蚊、灭蚊和易感人群的预防接种是预防本病的关键。目前尚无有效的药物可以治疗流行性乙型脑炎。
防蚊、灭蚊和动物接种 通过清除蚊虫孳生场所，开展宣传教育，改善环境卫生条件等方式控制蚊虫等传播媒介的数量。由于流行性乙型脑炎病毒的传播主要是在蚊—猪循环中进行，人是偶发感染宿主。所以在流行季节前，通过提前对猪等家畜进行疫苗接种，中止病毒的自然传播循环，可有效降低人群的发病率。
预防接种 我国主要使用由地鼠肾细胞培养制备的流行性乙型脑炎病毒P3株灭活疫苗。通常在病毒感染开始流行前1个月进行疫苗接种，重点接种对象是10岁以下儿童和来自非流行区的易感人群；主要采用皮下注射2次（间隔7～10天），次年加强注射1次的方式进行；预防接种后人群保护率可以达到76%～90%。但是，由于死疫苗诱导产生抗体的持续时间短、需要多次接种等缺点，减毒活疫苗的研究受到重视。目前，主要根据病毒吸附和形成蚀斑能力的差异来选育有效的减毒活疫苗，我国已经选育出的SA14-14-2和SA14-2-8株减毒活疫苗，对易感人群以及猪和马等家畜进行免疫接种后的抗体阳性率可达到90%以上，并且抗体产生的持续时间较长。
第三节 森林脑炎病毒
森林脑炎病毒即俄罗斯春夏脑炎病毒（Russian spring-summer encephalitis virus）或蜱传脑炎病毒（tick-borne Encephalitis virus）。此病毒引起的森林脑炎是一种中枢神经系统的急性传染病，属于自然疫源性疾病。森林脑炎由蜱传播，主要发生在春夏季（5～7月），感染者以林区人群、野外工作者等为主，在我国东北和西北的一些林区有森林脑炎的流行。
生物学性状 森林脑炎病毒属于黄病毒科、黄病毒属，其形态结构与乙型脑炎病毒相似。森林脑炎病毒的动物感染范围较广。小鼠对该病毒的易感性最高，通过多种途径均可以感染，脑内接种4～5天后即可发生脑炎。病毒在鸡胚、组织培养细胞内均可增殖。在使用猪肾细胞进行病毒培养时，可以观察到明显的CPE，而在其它细胞培养时则不出现CPE。森林脑炎病毒的抗原性比较单一，但与羊跳跃病毒有交叉反应。不同来源毒株的毒力差异较大。病毒对外界的抵抗力不强，加热60℃10分钟即可以被灭活，对乙醚、来苏儿等敏感。用50%甘油可长期保存。
致病性与免疫性 森林脑炎病毒的主要传播媒介是蜱（如全沟硬蜱、嗜群血蜱和森林革蜱）。病毒在蜱中不仅能越期传播（从蜱的一个发育阶段传至另一个发育阶段），也能经卵传播（从一个世代传至另一个世代）。病毒可以在蛰伏的蜱或脊椎动物（如刺猬和蝙蝠等）体内越冬。自然情况下，病毒由蜱叮咬并传染给森林中一些动物（如缟纹鼠、松鼠、刺猬和腮鼠等）和野鸟（如红雀、金雀和金翅雀等），构成自然的感染循环。蜱在春夏季大量繁殖，当易感人群进入林区，可被蜱叮咬而感染。此外，山羊被带病毒蜱叮咬之后，在2～10天内可以排病毒于羊奶中，人如饮用此新鲜羊奶，也可能会受到感染。人被病毒感染后，潜伏期为10～14天，起病急，突然出现高热、头痛、恶心和呕吐，继之出现昏睡、外周型弛缓性麻痹等症状。病死率一般为20%～30%，痊愈恢复的患者中大约30%～60%残留有后遗症。病后可获得牢固、持久的免疫力。
微生物学检查法 森林脑炎病毒的微生物学检查法与乙型脑炎病毒相似。可以从死亡患者脑组织分离出病毒，实验室工作人员分离病毒时应特别注意防护。
防治原则 森林脑炎的预防应以灭蜱及防蜱叮咬为重点，尤其是林区工作者应当采取防护措施。目前在我国林区进行接种的森林脑炎病毒疫苗是用组织培养制备的灭活疫苗，每年加强免疫接种1次，已证明有较好的预防效果。另外，对患者早期注射高效价的免疫血清可减轻病情。