逆转录病毒
文 / 谷鸿喜
逆转录病毒科（Retroviridae）是一大组含有逆转录酶 （reverse transcriptase）的RNA病毒，按其致病作用可分为3个亚科，即RNA肿瘤病毒亚科、慢病毒亚科及泡沫病毒亚科，其中对人致病的主要是人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）和人类嗜T细胞病毒（human T cell leukemia virus，HTLV）。
1．RNA肿瘤病毒亚科（Oncovirinae） 包括引起禽类、哺乳类及灵长类等动物的白血病、肉瘤、淋巴瘤等多种病毒，还包括引起人类白血病的人类嗜T细胞病毒。
2．慢病毒亚科（Lentivirinae） 包括引起人类免疫缺陷综合征的HIV和引起动物慢性感染症的病毒，如马传染性贫血病毒、绵羊脱髓鞘病毒及猫、猴免疫缺陷病毒等。
3．泡沫病毒亚科（Spumavirinae） 包括牛、猪、灵长类及人泡沫病毒，主要引起培养细胞发生泡沫样变性及细胞融合。
逆转录病毒具有以下共同特性：
1．病毒呈球形，有包膜，表面有刺突，其大小100nm左右。
2．病毒核心由两条相同单股RNA组成，在5’端通过部分碱基互补配对形成双体结构，它与内层衣壳构成电子密度强的中央类核。类核呈圆形的病毒称C型病毒颗粒，如人类嗜T细胞病毒；类核呈圆柱型的病毒称D型病毒颗粒，如人类免疫缺陷病毒。
3．逆转录病毒基因组组成相似，均含有序列及功能相似的 gag、pol和env等3个结构基因及多个调节基因。
4．病毒体内含有逆转录酶、核酸内切酶及RNA酶H等酶类，它们与病毒核酸逆转录、病毒的整合作用有关。
5．病毒增殖的特点是在复制病毒RNA时，在逆转录酶的作用下首先合成cDNA，构成RNA:DNA中间体。
第一节 人类免疫缺陷病毒
HIV是1983年法国巴斯德研究所Luc Montagnier等首先从一淋巴腺综合征（LAS）患者的淋巴结中分离出的一株新的逆转录病毒，称其为淋巴结肿大相关病毒（lymphadenopathy associated virus，LAV）。1984年初，RC Gallo等从AIDS患者外周血单个核细胞中分离到相似的逆转录病毒，称之为人类嗜T细胞病毒Ⅲ型（human T-cell lymphotropic virus type III，HTLV-III）。后经分子病毒学证实LAV和HTLV-Ⅲ是同一病毒的不同变种。为此，1986年国际病毒分类委员会将二者统称为人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV），所致疾病称为获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）。HIV包括HIV-1和HIV-2两个型别，两型病毒的核苷序列相差超过40%。世界上的AIDS多由HIV-1引起；HIV-2只在西非呈地域性流行。
一、生物学性状
形态结构 HIV为直径100nm～120nm大小的球形颗粒。电镜下病毒内部有一致密的圆柱状核心，该核心是由两条相同单股RNA构成的双体结构及包裹其外的衣壳蛋白（p24）组成，构成病毒核衣壳。病毒核衣壳外侧包有两层膜结构，内层是内膜蛋白（p17），亦称跨膜蛋白，最外层是脂质双层包膜，包膜表面有刺突并含有gp120和gp41包膜糖蛋白（图36-1）。
病毒基因组及功能 HIV基因组全长约9200bp，其5′端与3′端各有一段相同核苷酸序列，称为长末端重复序列（long terminal repeat，LTR）。中间为gag、 pol、 env 三个结构基因及tat等6个调节基因（图36-2）。
1．gag 基因 编码前体蛋白p55。p55经蛋白酶裂解形成3种蛋白（p24、p17、p15），p24是衣壳蛋白、p17是内膜蛋白，p15经蛋白酶水解成p7和p9，其中p7是核衣壳蛋白。衣壳蛋白p24特异性高。
2. pol基因 编码逆转录酶（p66/p51）、整合酶p32及蛋白水解酶p10。 逆转录酶具有多聚酶和核酸内切酶(RNase H)的功能，与病毒的复制有关。
3．env基因 编码病毒包膜糖蛋白（glycoprotein，gp），包括跨膜糖蛋白gp41及包膜表面刺突糖蛋白gp120。
图36-1 人类免疫缺陷病毒的结构
4．调节基因 HIV共有6个调节基因，其中tat、rev和 nef三个基因最为重要，其表达产物对HIV表达的正、负调节以及对维持HIV在细胞中复制的平衡均具有重要意义。如tat基因编码产物（p14）是一种反式激活的转录因子，与LTR结合后能促进病毒所有基因的转录，并能增强病毒mRNA的翻译；rev基因编码产物（p19）能增加gag、pol和env结构蛋白的合成；nef基因编码负调节蛋白，对病毒的结构蛋白和调节蛋白的表达均有负调节作用。此外还有vif 、vpu、vpr调节基因，其中vif基因产物能增强病毒体感染性，而vpu及vpr两基因产物能增强病毒的复制。基因组两端的LTR包含启动子、增强子和TATA序列。
图36-2 HIV的基因组结构
病毒的复制 HIV的复制过程与其它逆转录病毒相同。首先HIV包膜刺突糖蛋白gp120与靶细胞上特异受体（CD4分子等）结合，然后病毒包膜与细胞膜发生融合。核衣壳进入细胞浆内脱壳、释放出RNA进行复制。在病毒自身逆转录酶的作用下，以病毒RNA为模板，经逆转录形成互补的负链DNA，构成RNA:DNA中间体。中间体中的RNA被RNase H水解，再由负链DNA复制成双股DNA。在病毒基因整合酶的作用下，病毒基因组整合于细胞染色体基因组，这种整合的病毒DNA称为前病毒（provirus）。当各种因素刺激前病毒活化而进行自身转录时，LTR有启动和增强转录作用。在宿主细胞RNA多聚酶Ⅱ作用下，病毒DNA转录形成RNA。有些RNA经拼接成为mRNA，在细胞的核蛋白体上翻译成子代病毒的结构蛋白及非结构蛋白；还有些RNA经加帽加尾作为子代基因组RNA，在细胞膜处与结构蛋白装配成核衣壳，并通过宿主细胞膜获得包膜，构成完整的子代病毒体，以出芽方式释放到细胞外。
病毒的变异性 HIV基因组可发生变异，从而可以分离到生物学性状不完全相同的HIV毒株。基因组最易发生变异的是编码包膜糖蛋白的env基因和调节基因nef。根据env基因序列的异同可将目前全球流行的HIV-1分为M、O和N 3个组12个亚型，其中M组又分A~J共10个亚型，O和N组各一个亚型。HIV-2分A～F六个亚型。各亚型的分布因地区、流行时间及传播情况不同而异。据估计，HIV的env基因每个位点核苷酸的突变率大约为1‰，与流感病毒变异率相似。
培养特性 HIV感染宿主范围和细胞范围比较狭窄，仅感染表面有CD4分子的细胞。实验室常用正常人T细胞或病人自身分离出的T细胞经PHA刺激后培养2～4周分离病毒，也可用成人淋巴细胞白血病患者的T细胞来分离培养病毒。
抵抗力 HIV对理化因素抵抗力较弱。56℃加热30分钟可被灭活，但在室温下可存活几天。经化学消毒剂0.5%次氯酸钠、10%漂白粉、50%乙醇、35%异丙醇、0.3%H2O2、5%来苏儿处理10分钟HIV可完全被灭活。
二、致病性与免疫性
传染源和传播途径 AIDS的传染源是HIV携带者及AIDS患者。从这些HIV感染者的血液、精液、阴道分泌物、唾液、乳汁、脑脊液、脊髓及中枢神经组织等标本中均可分离到病毒。主要传播途径有三种：
1．性传播 是HIV的主要传播方式，因此AIDS是重要的性传播疾病（sexually transmitted disease，STD）之一。流行病学研究表明，该病在美国及西方国家主要以同性恋间性传播为主，非洲及东南亚地区则以异性性行为为主要传播途径。
2．血液传播 输入带有HIV的血液或血液制品，包括器官或骨髓移植、人工授精及使用受HIV污染的注射器和针头。中国AIDS感染者大多是由静脉注射吸毒引起。
3．垂直传播 包括经胎盘、产道或哺乳等方式传播，其中胎儿经胎盘感染最多见。
临床表现及致病机制
1．HIV感染临床表现 包括原发感染急性期、无症状潜伏期、AIDS相关综合征及典型AIDS四个阶段。
（1）原发感染急性期：病毒感染机体后开始大量复制，引起病毒血症，此时期从血液、脑脊液及骨髓细胞可分离到病毒，从血清中可查到HIV抗原。临床上可出现发热、咽炎、淋巴结肿大、皮肤斑丘疹和粘膜溃疡等症状。持续1～2周后HIV感染进入无症状潜伏期。
（2）无症状潜伏期：此期持续时间较长，一般5～15年。临床无症状，也有些患者出现无痛性淋巴结肿大。此期患者外周血中一般不能或很少检测到HIV抗原，这表明长期无症状的临床过程与病毒持续在体内进行低水平的复制有关。
（3）AIDS相关综合征（AIDS-related complex，ARC）：随着感染时间的延长，当HIV大量在体内复制并造成机体免疫系统进行性损伤时，临床上则出现发烧、盗汗、全身倦怠、慢性腹泻及持续性淋巴肿大等症状。
（4）典型AIDS：主要表现免疫缺陷症的合并感染和恶性肿瘤的发生。由于AIDS患者机体免疫力低下，一些对正常机体无致病作用的病原生物常可造成AIDS患者的致死性感染，如真菌（白色念珠菌）、细菌（分枝杆菌）、病毒（巨细胞病毒、人类疱疹病毒-8型、EB病毒）、原虫（卡氏肺孢子虫）等感染症。部分病人可并发肿瘤，如Kaposi肉瘤、恶性淋巴瘤、肛门癌、宫颈癌等。也有许多患者出现神经系统疾患，如AIDS痴呆综合征等。感染病毒10年内发展为AIDS的约占50%，AIDS患者于5年内死亡率约占90%。
2．HIV致病机制 主要是引起机体的免疫系统损伤而造成免疫功能障碍。
HIV主要侵害的靶细胞是CD4+ T细胞。HIV对这类细胞有高度亲嗜性，是因为这类细胞表面的CD4分子是HIV的受体。当HIV与靶细胞接触时，病毒体的包膜糖蛋白gp120上的CD4结合区与靶细胞CD4分子的V1区结合，引起gp41分子构象的改变，其疏水性N末端伸入靶细胞膜内，导致病毒包膜与细胞膜形成融合多肽而发生融合，进而使病毒侵入细胞。最近研究证明，除CD4分子外，细胞表面尚存在一些辅助受体。现已发现的辅助受体有CXCR4、CCR5、CCR2和CCR3等。其中CXCR4和CCR5是主要辅助受体。CXCR4是HIV嗜T细胞病毒株（T-tropic株）的辅助受体，趋化因子SDF1是CXCR4的天然配基，能阻断T-tropic病毒株与T淋巴细胞的结合。CCR5是嗜巨噬细胞病毒株（M-tropic株）的辅助受体，某些趋化因子是CCR5的配基，能阻断M-tropic病毒株与原代靶细胞的结合。HIV包膜gp120肽键的某些区段，如V3环基因的变异可以改变HIV的细胞亲嗜性。一般在艾滋病患病的早期，血液中的嗜巨噬细胞病毒占优势，随着疾病的发展，嗜T细胞病毒逐渐增多，最后以嗜T细胞病毒为主，其结果是大量CD4+ T细胞受病毒感染而遭破坏。造成以CD4+ T细胞（Th）减少为主所致的细胞免疫功能低下及免疫调节功能紊乱。
（1）HIV对CD4+ T细胞的损害：主要是通过病毒的直接致细胞病变作用及免疫病理机制所致。①受感染细胞表面的HIV包膜糖蛋白gp120与周围非感染细胞膜表面CD4分子相互结合，导致细胞融合，形成多核巨细胞，引起细胞死亡；②病毒增殖时，细胞染色体外的病毒DNA对细胞正常生物合成产生干扰作用并通过改变细胞膜的完整性和通透性，导致细胞损伤和死亡；③HIV感染能诱导细胞凋亡；④受感染细胞膜上有HIV糖蛋白抗原，可激活细胞毒性T细胞（CTL）的直接杀伤作用，也可与特异性抗体结合后，通过ADCC作用致使细胞破坏；⑤自身免疫的产生致使T细胞损伤。当HIV编码病毒抗原决定簇基因（如gp41）与细胞膜上MHCⅡ类分子基因有同源性时，就会诱导产生能与细胞发生交叉反应的自身抗体。
（2）对其他免疫细胞及神经细胞的损害：现在研究表明，HIV具有多嗜性，除感染CD4+ T细胞外，还能感染其他表面有少量CD4分子表达的细胞，如单核-巨噬细胞、树突状细胞、神经胶质细胞（主要为小胶质细胞）、皮肤的郎罕细胞、肺泡巨噬细胞、肝的枯否细胞及肠道粘膜的杯状、柱状上皮细胞和嗜铬细胞等。病毒可影响这些细胞的正常免疫及其他功能。HIV可随这些细胞特别是单核-巨噬细胞播散到全身，常使患者出现HIV脑病、脊髓病变、AIDS痴呆综合征等中枢神经系统疾患。
机体对HIV感染的免疫应答 机体在HIV原发感染后，一般1～3个月即可检出HIV抗体，包括抗gp120的中和抗体（图36-3）。中和抗体具有一定的保护作用，仅能减少急性期血清中的病毒抗原量，但不能彻底清除体内的病毒及感染细胞内的病毒。感染细胞内的病毒主要依靠机体的细胞免疫反应，包括细胞毒性T细胞（CTL）和NK细胞反应，也包括抗gp120、gp41在内的抗体介导的ADCC作用。特异性CTL对杀伤HIV感染细胞及阻止病毒扩散有重要作用，但CTL依然不能清除HIV潜伏感染的细胞。其主要原因是HIV能通过改变CTL识别的表面抗原决定簇、诱导细胞毒CD8+细胞的无反应性、改变病毒肽结构而使抗原决定簇被掩盖或通过降低细胞MHC的表达等而逃避CTL的杀伤作用，致使HIV不能彻底被机体清除，一经感染便终生携带病毒。
图36-3 HIV感染过程中HIV抗原和相关抗体及CD4+细胞的变化
三、微生物学检查法
检测抗体 一般HIV感染2～3个月（或更长）后均可检出HIV抗体，因此检测抗体对筛查（如供血者）和确认HIV感染非常重要。最近我国规定，对供血者筛查时必须同时检查HIV-1和HIV-2两个型别的抗体。检测HIV抗体常用的方法有ELISA、RIA、IFA及蛋白印迹（western blot）等。
常用ELISA试验筛查HIV抗体，阳性者必须进行确认试验。确认试验常用特异性高的蛋白印迹试验及核素免疫沉淀试验（RIP）。蛋白印迹试验是先通过SDS-PAGE电泳将HIV的各种蛋白进行分离，再转移于硝酸纤维素膜上形成多种抗原带，再与待检血清反应，此法可检出针对HIV不同结构蛋白的抗体。RIP试验是用核素标记HIV抗原进行免疫沉淀反应来测定HIV抗体。一般检测到两种HIV抗原的抗体（如p24和gp120抗体）方可肯定诊断。
病毒分离鉴定 大约需4～6周。首先分离正常人淋巴细胞（或用传代T细胞株H9、CEM），用PHA刺激并培养3～4天后，接种患者的单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等标本。经定期换液、补加PHA处理的正常人淋巴细胞，培养2～4周后，如出现不同程度病变，尤其见到多核巨细胞，则说明有病毒增殖。再用IFA法检测HIV抗原p24，或用生化反应检测培养液中逆转录酶活性，也可用电镜检测HIV颗粒来进行鉴定。
检测病毒蛋白抗原 常用ELISA法检测细胞中HIV的衣壳蛋白p24。此抗原通常出现于病毒感染的急性期，潜伏期常为阴性，但典型AIDS期又可重新被检出（图36-3）。
检测核酸 应用核酸杂交法检测细胞中前病毒DNA，可确定细胞中HIV潜伏感染情况；应用PCR法检测HIV的前病毒DNA，或用RT-PCR法定量检测血浆等标本中病毒RNA；定量检测方法常用于监测HIV感染者病情发展及评价药效。
四、防治原则
AIDS是一种全球性疾病，蔓延速度快、死亡率高，又无特效治疗方法，已引起全世界的关注。为此，WHO和包括我国在内的许多国家都制定了预防和控制HIV感染的措施，包括：①建立HIV感染的监测网络，控制疾病的流行蔓延；②普遍开展预防艾滋病的宣传教育，认识AIDS的传染方式及其严重危害性。取缔娼妓，抵制和打击吸毒行为；③对供血者进行HIV抗体检查，禁止进口血液制品，确保输血和血液制品的安全；④加强国境检疫，同时对高危人群要进行HIV抗体检测。
在特异性预防方面，主要是加强HIV疫苗的研制，但至目前为止仍缺乏理想的疫苗。由于减毒活疫苗、灭活疫苗难以保证疫苗的安全，因此，目前国内外致力于研究基因重组疫苗，现已进入临床Ⅰ、Ⅱ期试验的主要有：
1．基因工程亚单位疫苗 通过基因工程手段将HIV包膜糖蛋白gp120、gp160在酵母菌、杆状病毒系统或哺乳动物细胞中进行表达，将表达纯化的包膜蛋白制成疫苗。用其免疫人或动物后可诱导产生特异性中和抗体，并能激活特异性细胞免疫反应，还可以保护黑猩猩抵抗一定剂量HIV的攻击，证明此疫苗有保护作用。
2．重组活病毒载体疫苗 多用痘苗病毒、金丝雀痘病毒等活病毒做载体与HIV基因（如gp120、gp160）重组，构建成重组活病毒载体疫苗。动物实验及志愿者人体试验证明，该类疫苗可诱导特异性中和抗体的产生和T细胞免疫应答。
此外，包膜蛋白病毒样颗粒（vrius-like particles，VLP）、人工合成寡肽疫苗、DNA疫苗及抗独特型中和抗体等类型疫苗也在研究中。
AIDS的治疗：目前主要用于临床的药物有三类：①核苷类逆转录酶抑制剂，如叠氮胸苷（azidothymidine，AZT）、2'，3'-双脱氧肌苷（2'，3'-dideoxyinosine，ddI）与2'，3'-双脱氧胞苷(2'，3'-dideoxycytidine，ddC)和拉米夫定（lamivudine）等，这些药物能干扰病毒DNA合成，抑制病毒在体内的增殖；②非核苷类逆转录酶抑制剂，如德拉维拉丁（delaviradine）和耐维拉平（nevirapine），这类药物也是抑制病毒DNA合成；③蛋白酶抑制剂；如赛科纳瓦（saquinavir）、瑞托纳瓦（ritonavir）、英迪纳瓦（indinavir）和耐非纳瓦（nelfinavir）等，其作用机制是抑制HIV蛋白水解酶，使大分子聚合蛋白不被裂解而影响病毒的成熟和释放。现在临床上常使用联合治疗方法（俗称鸡尾酒疗法），包括使用两种以上逆转录酶抑制剂和蛋白酶抑制剂，比使用单药治疗效果好。
第二节 人类嗜T细胞病毒
1978年美国和日本学者从T淋巴细胞白血病患者的淋巴结和外周血淋巴细胞中分离到一种新病毒，认为与T淋巴细胞白血病有关，故命名为人类嗜T细胞病毒（human T cell lymphotropicvirus，HTLV）或人类T细胞白血病病毒（human T cell leukemia virus，HTLV）。后从1例毛细胞白血病患者的外周血中又分离到一种嗜T细胞病毒，称为HTLV-2型。将最初发现的称为HTLV-1型。两型间基因组同源性约为50%。
一、生物学性状
HTLV-1和HTLV-2在电镜下呈球形，因病毒颗粒中心有一密度高的圆形类核，故称为C型病毒颗粒，类核实质是核衣壳组成。病毒颗粒直径约为100nm左右。病毒包膜表面有刺突，其成分为糖蛋白（gp120），能与靶细胞表面的CD4分子结合，衣壳含有p24、p19和p15三种蛋白，病毒核心为RNA及逆转录酶。基因组为两条单链RNA，长约9.0kb。基因组结构类似HIV。两端均为长末端重复序列（LTR），中间从5’端至3’端依次排列为gag、pol、env三个结构基因和tax、rex两个调节基因。gag基因编码聚合蛋白前体，而后被酶解为p19、p24、p15蛋白，组成病毒的衣壳或核衣壳。3种蛋白均有抗原性，在感染者血清中可出现相应抗体。pol基因编码逆转录酶、RNase H和整合酶；env基因编码糖基化聚合蛋白，经酶解为gp46和gp21。gp46分布于细胞表面，在感染者血清中可查到抗gp46的抗体。p21为跨膜蛋白。tax基因编码p40，分布于感染细胞核内，可活化LTR，反式激活HTLV前病毒DNA转录，因此p40为反式激活蛋白。rex基因编码p27，为磷酸化蛋白，分布于细胞核内，与细胞的表达密切相关。此外，调节基因除有增加病毒基因转录产物表达的作用外，尚能激活细胞 的IL-2基因和IL-2受体基因以及原癌基因等细胞基因。
二、致病性和免疫性
HTLV-1型与HTLV-2型是引起人类肿瘤的逆转录病毒。
HTLV-1型是成人T细胞白血病（adult T-cell leukemia，ATL）的病原体。 HTLV-1的感染主要通过输血、注射、性接触等方式水平传播；也可通过胎盘、产道和哺乳等途径垂直传播。ATL多为40岁以上的成人发病。HTLV感染潜伏期长，多无临床症状，约有1/20感染者发生急性和慢性成人T细胞白血病。急性ATL主要症状为白细胞增多，淋巴结及肝、脾肿大，并可出现皮肤红斑，皮疹等皮肤及神经系统损伤等症状，而且血中乳酸脱氢酶、血钙、胆红素升高，预后不良。慢性ATL除白细胞数增多和皮肤症状外，仅少数病例有淋巴结、肝脾肿大症状，但血钙、胆红素不高。此外临床还分隐匿型和淋巴瘤型。HTLV-1型除能引起ATL外，尚可引起HTLV-1型相关脊髓病（HTLV-1 associated myelopathy，HAM）及热带痉挛性下肢轻瘫（tropical spastic paraparesis，TSP），因两者相似，故总称HAM/TSP。HAM以女性居多，主要症状为慢性进行性步行障碍与排尿困难，有时伴有感觉障碍。
HTLV-2型能引起毛细胞白血病和慢性CD4细胞淋巴瘤。
HTLV诱发白血病的机理尚未完全清楚。HTLV与急性RNA肿瘤病毒（如Rous鸡肉瘤病毒等）不同，它们不含有病毒癌基因（v-onc）。HTLV所致T 细胞白血病是一复杂过程。当HTLV吸附CD4+ T细胞时能激活IL-2受体基因，使CD4+细胞膜上出现IL-2受体，继而病毒基因组以前病毒的形式整合于宿主染色体中。前病毒的启动使IL-2的基因失控，导致IL-2过量表达。过量的IL-2与感染病毒的CD4+细胞膜上的IL-2受体结合，导致CD4+细胞的大量增殖。HTLV复制可产生tax蛋白，它能反式激活病毒的转录，促进病毒抗原表达；能激活细胞生长因子基因，促进生长刺激蛋白的表达；也能激活细胞原癌基因，促进转化蛋白表达。这些均可促进细胞转化和增殖。此外，HTLV前病毒DNA可以整合在不同细胞染色体上，并使细胞转化成不同克隆。当这些细胞继续增殖时，如克隆中个别细胞的染色体突变，这个细胞就会演变为白血病细胞。
机体被HTLV-1感染后，血清中可出现HTLV-1抗体，如p24、p21、gp46抗体等，但抗体出现后，病毒抗原表达量减少，影响细胞免疫清除感染的靶细胞。
三、微生物学检查法
病毒分离与鉴定 采取患者新鲜外周血分离淋巴细胞，经PHA处理后，加入含有IL-2的营养液培养3～6周，然后用电镜观察细胞中的C型病毒颗粒，并检查细胞培养液上清的逆转录酶活性，同时用抗HTLV免疫血清或单克隆抗体进行病毒鉴定。用PCR检测外周血单个核细胞或培养细胞中前病毒DNA是最敏感的方法，对无症状HTLV感染者也可提高检出率。
抗体检测 检测HTLV特异性抗体是HTLV感染实验室诊断的主要方法依据。常用方法：
1．ELISA法 用HTLV-1病毒裂解物或裂解物加重组env p21蛋白作抗原，与患者血清反应后再加酶标记的抗人IgG，最后加酶底物显色来检测 HTLV-1/2抗体。最近用型特异性合成肽抗原检查相应抗体，可区别HTLV-1和HTLV-2型感染。
2．间接免疫荧光法 以HTLV-1/2感染的T细胞株作靶细胞抗原制成细胞涂片，加患者血清反应后再加荧光素标记的抗人IgG，荧光显微镜下观察荧光阳性细胞，判定患者血清中有无特异性HTLV-1/2的抗体。
蛋白印迹法常用于ELISA初筛后进行确认实验，它可测定患者血清中病毒结构蛋白的特异性抗体。
四、防治原则
目前对HTLV感染尚无特效的防治措施，可以采用IFN-α和逆转录酶抑制剂等药物进行治疗。